Uso previsto

La prueba combinada Dengue NS1 Ag-IgG/IgM es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de anticuerpos (IgG e IgM) y antígeno NS1 del virus del dengue contra el virus del dengue en suero o plasma para ayudar en el diagnóstico de la infección viral del dengue.

[RESUMEN]

La fiebre del dengue es una enfermedad infecciosa aguda transmitida por vectores causada por el virus del dengue transmitido por mosquitos.La infección por el virus del dengue puede provocar una infección recesiva, dengue, dengue hemorrágico, dengue hemorrágico.Las manifestaciones clínicas típicas del dengue incluyen aparición repentina, fiebre alta, dolor de cabeza, dolor intenso en músculos, huesos y articulaciones, erupción cutánea, tendencia a sangrar, agrandamiento de los ganglios linfáticos, disminución del recuento de glóbulos blancos, trombocitopenia, etc.Esta enfermedad básicamente tiene popularidad en áreas tropicales y subtropicales, porque esta enfermedad es transmitida por el mosquito Aides, por lo que su popularidad tiene cierta estacionalidad, siendo todos los años comúnmente en mayo ~ noviembre, el pico es en julio ~ septiembre.En la nueva zona epidémica, la población es generalmente susceptible, pero la incidencia es principalmente en adultos, en la zona endémica, la incidencia es principalmente en niños.

Principio

La prueba combinada Dengue NS1 Ag-IgG/IgM es un inmunoensayo cualitativo basado en tiras de membrana para la detección de anticuerpos contra el virus del dengue (IgG e IgM) y el antígeno NS1 del virus del dengue en suero o plasma.

Para la prueba de IgG/IgM: El dispositivo de prueba consta de: 1) una almohadilla conjugada de color burdeos que contiene antígenos de envoltura recombinantes del dengue conjugados con oro coloidal (conjugados del dengue), 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene dos líneas de prueba (líneas T1 y T2) y una línea de control (línea C).La línea T1 está prerrecubierta con el anticuerpo para la detección de IgM anti-dengue, la línea T2 está recubierta con el anticuerpo para la detección de IgG anti-dengue.Cuando se dispensa un volumen adecuado de muestra de prueba en el pocillo de muestra del casete de prueba, la muestra migra por acción capilar a través del casete.La IgG antidengue, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados del dengue.Luego, el inmunocomplejo es capturado por el reactivo recubierto previamente en la banda T2, formando una línea T2 de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de dengue IgG y sugiere una infección reciente o repetida.La IgM anti-dengue, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados del dengue.Luego, el inmunocomplejo es capturado por el reactivo recubierto en la línea T1, formando una línea T1 de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de dengue IgM y sugiere una nueva infección.La ausencia de líneas T (T1 y T2) sugiere un resultado negativo.

Para la prueba NS1: En este procedimiento de prueba, el anticuerpo NS1 anti-Dengue se inmoviliza en la región de la línea de prueba del casete.Después de colocar una muestra de sangre entera/suero/plasma en el pocillo de la muestra, reacciona con las partículas recubiertas de anticuerpo anti-Dengue NS1 que se han aplicado a la almohadilla de la muestra.Esta mezcla migra cromatográficamente a lo largo de la tira reactiva e interactúa con el anticuerpo NS1 anti-Dengue inmovilizado.Si la muestra contiene el antígeno NS1 del virus del dengue, aparecerá una línea de color en la región de la línea de prueba que indica un resultado positivo.Si la muestra no contiene el antígeno NS1 del virus del dengue, no aparecerá una línea de color en esta región que indique un resultado negativo.

Para servir como control del procedimiento, siempre aparecerá una línea de color en la región de la línea de control que indica que se ha agregado el volumen adecuado de muestra y que se ha producido la absorción de la membrana.

Almacenamiento y estabilidad

Guárdelo tal como está empaquetado en la bolsa sellada a temperatura ambiente o refrigerado (4-30 ℃ o 40-86 ℉).El dispositivo de prueba es estable hasta la fecha de vencimiento impresa en la bolsa sellada.

La prueba debe permanecer en la bolsa sellada hasta su uso.

Recolección y preparación de muestras

1. La prueba combinada Dengue NS1 Ag-IgG/IgM se puede realizar en suero o plasma.

2. Recolectar muestras de sangre total, suero o plasma siguiendo los procedimientos habituales de laboratorio clínico.

3. Las pruebas deben realizarse inmediatamente después de la recolección de la muestra.No deje las muestras a temperatura ambiente por períodos prolongados.Para almacenamiento a largo plazo, las muestras deben mantenerse por debajo de -20 ℃.

4. Lleve las muestras a temperatura ambiente antes de realizar la prueba.Las muestras congeladas deben descongelarse completamente y mezclarse bien antes de realizar la prueba.Las muestras no deben congelarse ni descongelarse repetidamente.

Procedimiento de prueba

Deje que la prueba, la muestra, el tampón y/o los controles alcancen una temperatura ambiente de 15 a 30 ℃ (59 a 86 ℉) antes de realizar la prueba.

1. Deje que la bolsa alcance la temperatura ambiente antes de abrirla.Retire el dispositivo de prueba de la bolsa sellada y úselo lo antes posible.Coloque el dispositivo de prueba sobre una superficie limpia y nivelada.

2. Para la prueba de IgG/IgM: sostenga el gotero verticalmente y transfiera 1 gota de muestra (aproximadamente 10 μl) al pocillo(s) de muestra del dispositivo de prueba, luego agregue 2 gotas de tampón (aproximadamente 70 μl) e inicie el cronómetro.Vea la ilustración a continuación.

3. Para la prueba NS1: Sostenga el gotero verticalmente y transfiera de 8 a 10 gotas de suero o plasma (aproximadamente 100 μl) al pocillo (S) de muestra del dispositivo de prueba, luego inicie el cronómetro.Vea la ilustración a continuación.

4. Espere a que aparezcan las líneas de colores.Leer resultados a los 15 minutos.No interpretar el resultado después de 20 minutos.

Interpretación de resultados

Positivo:

Para la prueba IgG/IgM: la línea de control y al menos una línea de prueba aparecen en la membrana.La aparición de la línea de prueba T2 indica la presencia de anticuerpos IgG específicos del dengue.La aparición de la línea de prueba T1 indica la presencia de anticuerpos IgM específicos del dengue.Y si aparecen tanto la línea T1 como la T2, indica la presencia de anticuerpos IgG e IgM específicos del dengue.Cuanto menor sea la concentración de anticuerpos, más débil será la línea de resultados.

Para la prueba NS1: Aparecen dos líneas.Siempre debe aparecer una línea en la región de la línea de control (C) y otra línea de color aparente debe aparecer en la región de la línea de prueba.

Negativo:

Aparece una línea de color en la región de control (C). No aparece ninguna línea de color aparente en la región de la línea de prueba.

No válido: la línea de control no aparece.Un volumen de muestra insuficiente o técnicas de procedimiento incorrectas son las razones más probables del fallo de la línea de control.Revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo dispositivo de prueba.Si el problema persiste, deje de usar el kit de prueba inmediatamente y comuníquese con su distribuidor local.